增溶溶解对于任何要纯化的蛋白质都是必须的，因为全部分离步骤通常只在水溶液 中进行。在有些情况下，增溶溶解仅仅涉及到将含有要分离的蛋白质的细胞打碎，而在另 一些情况下，还可能包括将亚细胞器的蛋白质取出来。增溶溶解的方法很多，但所选用的 方法必须考虑到要被破碎的细胞的特性以及接着要分离出来的蛋白质的本质。例如，如果 要分离的蛋白质是位于线粒体之类的细胞器里，则其目标首先是分离线粒体，然后从纯化 了的线粒体中把蛋白质溶解出来，这样就要考虑采用非常温和的破碎细胞的方法，以防止 损害细胞器。如果目的仅仅是破碎细胞并把蛋白质溶解出来而不管其存在的部位，则可采 用比较粗暴的方法。样品的大小是强烈地影响增溶溶解方法的挑选的另一个考虑，用于破 碎几毫克培养的动物细胞的方法，在处理几千克酵母或牛肝时，用处就很小了。现将各种 增溶溶解的方法简述如下：
(一）渗透细胞作用
渗透细胞是破碎细胞最温和的方法之一。这个方法是将细胞放在低渗状态下，并施以 一个温和的破裂力而实现的，例如把细胞吸入吸管内。由于这个方法的本质温和，因而限 制了它的应用，它用于只有细胞膜并以单个细胞存在的细胞类型。而对于那些具有坚韧 的、含糖的细胞壁，如细菌、植物、霉菌等，这个方法是无用的。如果这些微生物的细胞壁被 先用酶解方法除去，则此法也可以应用。对于大肠杆菌而言，溶菌酶能有效地除去其细胞 壁，对若干种酵母，Glusulase(硫酸酯酶和葡萄糖苷酶的混合物)有作用。除了应用上的限 制外，此法只能用于稀溶液中的小样品，因此，此法不能用于大分子的大量纯化，但可分离 各种细胞器或小量不稳定的大分子，例如mRNA等。当用此法纯化核酸时，加入去污剂可 能对破裂细胞有帮助，并可以保护核酸免于被酶破坏。
(二） 组织匀浆器
玻璃组织匀浆器是破碎细胞的温和的常用方法之一。有手工操作的组织匀浆器与马 达驱动的组织匀浆器两种。玻璃组织匀浆器有各种大小，能供1ml〜50ml样品体积使用。 在使用前，适当的合格的组织匀浆器的选择是相当重要的。常常有不合格的，如不是过松 就是过紧，致使匀浆效果不好或难于操作。玻璃组织匀浆器常用于动物脏器细胞的破碎， 如肝、胸腺等，不能用于破碎细菌。有时加入细玻璃珠(直径45/xm〜55um)混合研磨，但玻 璃珠能吸附某些蛋白质，因此效果不好。
(三） 组织捣碎器
组织捣碎器是常用的粗暴的破碎细胞的方法之一。它有各种体积的大小规格，并可调 速，在破碎细胞过程中必须保持样品冷冻，因为连续工作30s〜45s以上时间，温度将肯定 地升高(1(TC或更多）。组织捣碎器常用于植物与动物组织的破碎，但对于细菌则不用。如 果用浓稠的细菌悬液并按其体积的1/3到1/2加入玻璃珠，对细菌的捣碎可能有所改善， 这时细菌不是被捣碎器的刀口绞碎，而是由于玻璃珠与夹在其间的细菌彼此碰撞而破碎 的，然而并不常用。
(四） 起声细胞破碎器
超声细胞破碎器或称超声振荡器，是破碎细胞或细胞器尤其是破碎细菌最常用的和 有效的方法之一。有时先用溶菌酶处理，后用超声破碎，效果则更好。超声细胞破碎器通 常由两个主要元件组成:①高频电发生器，产生高强度超声信号;②电功率转送器，把超声 波传送到与它接触的溶液中去。也就是由于超声波形成的冲击和振动，引起细胞的破碎。 选用各种大小的探头可使超声波振荡器适用于几毫升到1L的样品量。主要的缺点是电 功率转送器里产生大量的热。因此必须仔细地监视样品的温度，并将超声细胞破碎器振荡 的时间控制到最小，并必须用冷却处理，间歇超声，藉以保证样品温度控制在l0°C以下。 超声细胞破碎器国内已有较好的产品可供采用。
(五） 挤压器
挤压器可用于捣碎微生物。国外有三种主要类型的挤压器:①Hughes挤压器;② French挤压器;③Eton挤压器。这三种挤压器的作用均是在1. 78X104N〜3. 56X 104N 压力下迫使小量的（5ml〜10ml)细胞悬液通过一个小孔。French和Eton挤压器的开口为 6mm或更小的孔，Hughes挤压器的开口是在二块扁平板之间有个很小的距离，当细胞通 过小孔隙时就被撕破。挤压器的方法既温和又彻底，但是它能容纳的样品量有限，故应用 受到限制。
(六） 从亚细胞组分中溶解蛋白质
许多蛋白质是同亚细胞组分相结合的(如细胞膜），分离亚细胞组分后必须把蛋白质 溶解下来，这是纯化这类蛋白质的先决条件。对于疏松结合的蛋白质而言，通常将亚细胞 组分悬浮于高离子强度的溶液中就行了，常用的有5mol/L〜6. 5mol/L KC1或NH4C1溶 液。但是，这种溶液对于结构蛋白质，以及起催化功能的蛋白质，例如牢固地结合的膜蛋白 的释放是无效的。这时必须使用低浓度温和的离子型去污剂或非离子型去污剂，例如脱氧 胆酸钠、Triton化合物等，有时合并使用温和的超声波帮助，把亚细胞结构拆散。
